顯微計數法是將一定體積的供試液濾過，使所含不溶性微粒截留在微孔濾膜上，在100倍顯微鏡下，用經標定的目鏡測微尺分別測定其最長直徑在10μm以上(≥10um)和25μm以上(≥25um)的微粒，根據過濾面積上的微粒總數，計算出被檢測的供試液每1ml(或每個容器)中含不溶性微粒的數量。
1、操作的實驗環境、儀器和用具
(1) 實驗環境 顯微計數法不溶性微粒儀的實驗操作所處環境應不得引入外來微粒，可以在超凈室、層流凈化臺或能符合要求的潔凈實驗室中進行。玻璃儀器和其他所需的用品都應潔凈。顯微計數法所用微粒檢查用水(或其他適宜溶劑)，使用前須經不大于1.0μm的微孔濾膜濾過。
(2) 顯微鏡 雙筒大視野顯微鏡，目鏡內附標定的測微尺(每格5～10um)。坐標軸前后、左右移動范圍均應大于30mm，顯微鏡裝置內附有光線投射角度、光強度均可調節的照明裝置。檢測時放大100倍。
(3) 鏡臺測微尺(用于目鏡測微尺的標定)。
微孔濾膜 白色，孔徑0.45μm、直徑25mm(或13mm)，一面印有間隔3mm的格柵；膜上如有10μm以上(≥10um)的不溶性微粒，應在5粒以下，并不得有25μm以上(≥25um)的微粒，必要時，可用微粒檢查用水沖洗使符合要求。
(4) 直徑25mm(或13mm)夾式定量濾器。
(5) 平皿。
(6) 平頭無齒鑷子。
(7) 計數碼器。
2、顯微計數法不溶性微粒儀的操作方法
(1) 供試品檢查前的準備
(2) 取50ml微粒檢查用水(或其他溶劑)，經微孔濾膜(一般孔徑為0.45μm)濾過，置于潔凈的適宜容器中，旋轉使可能存在的微粒均勻，靜置待氣泡消失。按顯微計數法項下的檢查法檢查，每50ml中含10μm以上(≥10um)的不溶性微粒應在20粒以下，含25μm以上(≥25um)的不溶性微粒應在5粒以下。否則表明微粒檢查用水(或其他溶劑)、玻璃儀器和實驗環境不適于進行微粒檢查，應重新進行處理，檢測符合規定后放可進行供試品檢查。
(3) 用水沖洗平皿，再用凈化水反復沖洗，瀝干，置實驗環境中備用。
(4) 在凈化臺上，將濾器用凈化水沖洗至潔凈，用平頭無齒鑷子夾取2.4項下符合要求的測定用微孔濾膜置濾器托架上，用濾器夾固定濾器，倒置，反復用凈化水沖洗濾器內壁，瀝干后安裝在抽濾瓶上備用。
(5) 待檢樣品應事先除去外包裝，并用凈化水將容器外壁沖洗干凈，置適宜實驗環境中備用。
(6) 檢查法
標示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液 除另有規定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺上小心翻轉20次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法
(7) 抽取或量取供試品溶液25ml，沿濾器內壁緩緩注入經預處理的濾器(濾膜直徑25mm)中，靜置1分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25ml，沿濾器內壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干，然后用平頭無齒鑷子將濾膜移置平皿上(必要時，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整)，微啟蓋子使濾膜干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺上。調好入射光，放大100倍進行顯微測量，，調節顯微鏡至濾膜格柵清晰。移動坐標軸，分別檢測有效過濾面積上最長粒徑在大于10μm(≥10um)和25μm以上(≥25um)的微粒數。另取至少兩個供試品，同法測定，計算測定結果的平均值。
(8) 標示裝量為25ml以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液 除另有規定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺上小心翻轉20次，使混合均勻。立即小心開啟容器，用適宜的方法直接抽取容器中的全部溶液，沿濾器內壁緩緩注入濾器(濾膜直徑13mm)中，照上述3.2.1同法測定。
(9) 靜脈注射用無菌粉末及供注射用無菌原料藥 除另有規定外，照光阻法檢查法3.2.3或制備供試品溶液，同3(2)操作測定。
3、記錄與計算
(1) 記錄 顯微計數法不溶性微粒儀的記錄應包括所用儀器型號；供試品包裝情況，檢驗數量；測定用濾膜處理前后微粒水平，微粒檢查用水來源或制備情況與含微粒數。
(2) 計算 用手撳計數碼器分別統計濾膜上直徑10μm以上(≥10um)的微粒數，以及25μm以上(≥25um)的微粒數，計算，即得每1ml供試品溶液(或每個容器或每份供試品)中所含10μm以上(≥10um)和25μm以上(≥25um)的不溶性微粒數。
4、注意事項
(1) 各種形狀的微粒應以實測到的最長粒徑計算，重疊微粒和聚合膠體微粒均以單個微粒計數；結晶析出不屬于檢測范圍，故不應計算。
(2) 必要時另取微粒檢查用水(或其他溶劑)25ml照3.2.1項下自“沿濾器內壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干”起，依法操作，此項空白試驗僅可視作對操作環境、實驗用具的認證，所得數據不必在供試品檢查結果中扣除，但對檢測結果的正確與否有密切關系。此項試驗必須檢測全濾膜，達到3(1)的要求后方可進行樣品檢測。
(3) 顯微計數法不溶性微粒儀檢測法不適用于乳液型和混懸型注射劑，對于黏度過高者，光阻法和本法均無法測定時，可用適宜的溶劑經適量稀釋后測定。
(4) 供試品的檢查數量：為確保檢查結果具有統計學意義，除另有規定外，一般應取供試品3瓶(支)以上進行不溶性微粒檢查。
5、結果與判定
(1) 標示裝量為100ml或100ml以上的靜脈用注射液 除另有規定外，每1ml中含10μm以上(≥10um)的微粒不超過12粒，含25μm以上(≥25um)的微粒不超過2粒，判為符合規定。
(2) 標示裝量為100ml以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料 除另有規定外，每個供試品容器中含10μm以上(≥10um)的微粒不超過3000粒，含25μm以上(≥25um)的微粒不超過300粒，判為符合規定。
以上就是梓夢科技編輯部的小編介紹的詳細的關于顯微計數法不溶性微粒儀檢測法的操作教程，如果還有很多朋友在操作中有疑問的歡迎聯系梓夢科技
服務熱線：400-8810-898
產品分類
更新時間：2024-10-26 
瀏覽次數：1548
您的位置：
